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請詳細介紹儀器分析的校正方法

時間:2022-05-03 08:11 點擊次數:
 

目前,化學發光免疫分析儀憑借其較強的特異性、極高的靈敏度及操作簡單、快速等優勢深受檢驗者的認可與歡迎,稱為非同位素標記免疫分析的一種重要方法。然而,當前國內沒有對此類設備儀器制定相應的校準方法,導致結果極容易受設備影響出現誤差。本文主要分析化學發光免疫分析儀的工作原理,并簡要闡述該儀器的校準措施,目的在于提高設備的精準度,為后續檢驗分析奠定扎實基礎。

請詳細介紹儀器分析的校正方法

公元前數百年就存有生物發光情況的相關記錄,人們發覺自然環境下很多真菌、細菌等均存在發光現象,只是發光強度較低,人視網膜可感知度僅為10.3~10.4,需利用光電倍增管進行放大擴大感知強度。隨著科學技術水平的不斷提高,至近20年,人們提出借助發光進行化學分析這一理念,尤其是近10年,將免疫檢測與化學發光結合在一起,誕生了發光免疫技術,該技術迅速在免疫學及醫學界得到普及應用。與其他醫學檢驗相同,免疫檢驗結果的準確性對醫療質量具有重要影響,對其造成影響的因素一般分為3個階段,即標本分析前階段、標本分析中階段與標本分析后階段。唯有合理控制檢測過程中各階段的質量,才可以縮減誤差,確保最終結果準確。但通過查找檢索相關資料發現,我國目前對化學發光免疫分析儀的校準方法尚無明確規定,而相關機構越來越需要相關校準檢測,所以,深入研究此設備儀器的校準方法勢在必行。以下對該儀器校準方法相關內容進行論述,僅供參考。

1,化學發光免疫分析儀工作原理

在20世紀90年代提出化學發光免疫分析系統,至今全球輩輮僅有BECKMAN公司、BAYER公司等少數制造商可以單獨生產此類設備。我國目前對此系統進行研制的機構有浙江工業大學、中國原子能科學院等,但目前依舊處在實驗模擬階段。

化學發光免疫分析儀指的是通過發光劑對抗體進行直接標記施行免疫分析法所需的分析儀器。而免疫分析的原理為:化學反應檢驗過程中,部分化學基經氧化作用后呈激發態,當返回原始基態時同步發射固定波長的光子,在需進行免疫分析的抗體或抗原上標記此類化學基團,由此形成的非放射免疫分析統稱為化學發光免疫分析。該免疫分析方法的優勢在于特異性強、靈敏度高、準確性好、適用范圍廣、操作簡單,試劑價格低等。醫學界已將其視為一種非同位素標記免疫分析的重要方法。但需注意,因為化學發光免疫分析儀本身自動化水平強、檢測靈敏度高,所以其準確度評價僅采取標準生化試劑在被檢分析儀上遵照操作說明多次重復檢測,視其檢測結果與標準生化試劑靶值是否符合。

2,校準試劑、設備及工作環境

(1)校準試劑、設備。校準試劑選擇標準生化試劑,為不確定度0.3%的免疫質量控制血清。校準設備包括有:A級50mL移液管,25mL量杯,A級0.25mL分度吸管,1kW,220V電子交流穩壓器,混勻器等。

(2)校準工作環境。一般選擇室內校準環境,溫度控制在(15~25)°C,相對濕度控制在低于80%。保證室內環境整潔、做好防塵,同時對電源電壓使用電子交流穩壓器進行穩壓。需注意的是,應盡量遠離強電磁場干擾區域。

3,校準項目及方法

3.1外觀

利用直觀目測法對分析儀的表面涂漆、鍍層、剝離器件等進行檢查,保證分析儀不存在影響工作性能的機械性損傷。用手輕撥動儀器各開關、旋鈕,檢查其緊固情況,同時將其調制準確位置。保證樣品臺整潔、平穩。分析儀應附帶齊全的說明書、合格證書及相應配套附件,銘牌字跡應清晰無污染,標有生產日期、型號、廠名、編號等內容。

3.2校準準確度

校準分析儀前應平衡標準生化試劑、分析儀及校準室內間的溫度,時間約為2h,連通電源進行設備預熱,時間為15min,根據說明書預調分析儀各處旋鈕、開關至指定位置。進行標準液的配置,選用多項目免疫質量控制血清校準發光免疫分析儀的準確定,并進行重復性校準。使用移液管及分度吸管取質量控制血清5mL,同時取復溶液5mL,同時置入25mL量杯內。將該量杯放于混勻器內進行混合,時間為30s,遵照常規檢測方法使用分析儀進行檢測,連續重復6次,將首次檢測結果舍去,剩余數據記錄至記錄表內,計算取平均值,與標準生化試劑證書內的靶值進行比較,判斷其符合程度。當檢測結果符合標準生化試劑證書內靶值要求同時優于10%以上視為儀器準確度校準完成。

3.3重復性校準

將分析儀調節好,斷開電源開關后復聯啟動,測量校準液,再次重復上述操作,檢測6次,去除首次檢測結果,記錄后續數據計算標準偏差,判定結果與標準生化試劑靶值要求是否符合。

依據格拉布斯準則去除可疑數值后按照式(1)計算變異系數。

請詳細介紹儀器分析的校正方法

重復性應符合標準試劑靶值要求并<5%。待儀器設備精確度校準、重復性校準完成后做好檢測報告,同時注明校準結果。每隔一段時間需對分析儀進行校準,周期控制在1年以內。

3.4化學發光免疫分析儀校準過程中的注意事項:

(1)進行校準期間應選擇相同類型的免疫質量控制血清標準物進行檢測,不可多種血清混合使用。

(2)免疫質量控制血清的稀釋倍數及復溶應嚴格遵照使用說明書的內容操作,不可隨機更改數值。

(3)配置校準過程中的復溶液時應使用相同液體,不可選擇其他液體替換。

(4)校準完成后剩余質量控制血清應妥善處理,不可留用于隔日測量,這是由于試劑內部分反應物存在不穩定的化學性質,極易擴散至溶液內,形成污染影響檢測結果。

4,總結

化學發光免疫分析儀通常作為一項檢測病患血清,分析人體免疫情況的檢驗儀器?;瘜W發光免疫測定屬于一類敏感度高的微量測定技術,醫學普遍用于測量腫瘤標志物、甲狀腺激素標志物等。時至今日,免疫分析歷經了放射免疫分析、熒光免疫分析、酶標免疫分析等各個階段,化學發光免疫分析成為新的發展階段,其憑借快速、高效、精準、環保等優勢深受檢驗者的認可。其能夠將化學標記、電子標記、智能計算控制三者結合,以此用于開展化學發光免疫分析、細胞發光分析、微生物發光分析等。由于其設備及工作原理的特殊性,我國尚未對其校準方法有明確規定,所以亟待對此內容深入研究。從工作原理、校準試劑、設備及工作環境、校準項目及方法等3方面進行闡述,目的在于提高免疫分析質量,推動我國免疫學及醫學進一步發展。

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